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    原代細(xì)胞培養(yǎng)體系是研究細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的重要工具

    發(fā)布時(shí)間： 2023-03-10　　點(diǎn)擊次數(shù)： 1745次
    　　原代細(xì)胞培養(yǎng)體系是在無(wú)血清的條件下，使用營(yíng)養(yǎng)液和適合細(xì)胞生長(zhǎng)的基質(zhì)來(lái)培養(yǎng)從動(dòng)物體內(nèi)取得、未經(jīng)過(guò)培養(yǎng)和分離的原代細(xì)胞。這種培養(yǎng)方法可以維持細(xì)胞的各種原始性狀，包括形態(tài)、基因表達(dá)模式、生長(zhǎng)倍增時(shí)間、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等等。

    　　在原代細(xì)胞培養(yǎng)體系中，細(xì)胞通常是在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中生長(zhǎng)的。為了維持細(xì)胞的正常生長(zhǎng)，需要提供充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、適宜的氧氣濃度和pH值，并且要保持細(xì)胞培養(yǎng)容器的清潔和無(wú)菌狀態(tài)。在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中，有時(shí)也需要添加一些生長(zhǎng)因子、膠原蛋白和膠原酶等物質(zhì)，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化。

    　　為了儲(chǔ)存原代細(xì)胞，可以采用低溫保存或凍存的方法。低溫保存一般使用液氮或干冰等高質(zhì)量的低溫冰霜來(lái)存儲(chǔ)細(xì)胞。在凍存細(xì)胞時(shí)，一般會(huì)將細(xì)胞懸浮在含有10% DMSO（二甲基亞砜）的培養(yǎng)基中，然后將其置于液氮中。這種方法可以保證細(xì)胞的正常存活，并可以長(zhǎng)期保存細(xì)胞。
     

     

    　　原代細(xì)胞培養(yǎng)體系指的是從組織或器官中取得的初代細(xì)胞，通過(guò)分離和培養(yǎng)形成的體系。它是研究細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的重要工具。

    　　原代細(xì)胞的分離和培養(yǎng)一般包括如下步驟：

    　　1. 制備工具和試劑。需要準(zhǔn)備顯微鏡、離心機(jī)、生物安全柜、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、酶、抗生素等。

    　　2. 取得組織樣本。可以是動(dòng)物或植物的各種組織，如肝臟、腎臟、胃等。

    　　3. 組織消化。將組織切碎成小塊，加入酶或蛋白酶等消化酶，使細(xì)胞質(zhì)解除，細(xì)胞分離。

    　　4. 細(xì)胞篩選。將細(xì)胞溶液過(guò)篩，去除多余的物質(zhì)如組織碎片等，留下單個(gè)的生物細(xì)胞。

    　　5. 培養(yǎng)基配制。根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型和需求配制不同的培養(yǎng)基，增加適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)成分、生長(zhǎng)因子、抗生素等。

    　　6. 細(xì)胞培養(yǎng)。將分離出的細(xì)胞加入培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)?？梢允褂门囵B(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶和生物反應(yīng)器等設(shè)備。

    　　7. 細(xì)胞觀(guān)察和維護(hù)。在培養(yǎng)過(guò)程中觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)、形態(tài)和功能。定期更換培養(yǎng)液、抗生素，定期排除細(xì)胞污染。

    　　8. 細(xì)胞傳代。當(dāng)細(xì)胞至達(dá)定量時(shí)，需要進(jìn)行傳代，即分離細(xì)胞，并重新進(jìn)行培養(yǎng)。傳代的次數(shù)通常在3-10次。

    　　如此反復(fù)培養(yǎng)、傳代，可形成成系列化的原代細(xì)胞體系。成系列化的原代細(xì)胞可以應(yīng)用于各種生物醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)研究，如疾病的研究、細(xì)胞治療、藥物篩選等。